簡(jiǎn)要描述:李記生物Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣,無細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。
產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
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分子式 | / | 純度 | / |
分子量 | / | 貨號(hào) | AC19L021/AC19L022 |
規(guī)格 | 100T/10*100T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
螢火蟲熒光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin,在Luciferin 氧化的過程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(Bioluminescence)。海腎熒光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白,在氧氣存在的條件下,可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide,在Coelenterazine 氧化的過程中也會(huì)發(fā)出生物熒光。生物熒光可以通過化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。
在 DLR 檢測(cè)中,螢火蟲(Firefly)熒光素酶和海腎(Renilla)熒光素酶的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。先是先以熒光素(Luciferin)為底物來檢測(cè)螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase),后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測(cè)海腎熒光素酶(Renilla Luciferase),并在后續(xù)加入海腎熒光素酶底物時(shí),同時(shí)加入抑制螢火蟲熒光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質(zhì),使后續(xù)檢測(cè)僅僅檢測(cè)到海腎熒光素酶的活性,實(shí)現(xiàn)雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。通過熒光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系,可以非常靈敏、高效地檢測(cè)基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5' 啟動(dòng)子區(qū)克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等,構(gòu)建成報(bào)告基因(Reporter Gene)質(zhì)粒,然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞,測(cè)定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對(duì)更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參,以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣,無細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | AC19L021 | 100 T |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | AC19L022 | 10*00 T |
試劑盒組分
組份 | AC19L021(100T) | AC19L022(10*00T) |
A.5× Passive Luciferase Lysis Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
B.Firefly Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
C.D-Luciferin | 2 mg | 10*2 mg |
D.Renilla Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
E.50× Coelenterazine | 200 µL | 10*200 uL |
保存方法
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃保存,有效期12個(gè)月。
【注】:C組分建議預(yù)先使用B組分配制為2 mg/mL儲(chǔ)液,B組分、D組分及配制為儲(chǔ)液的C組分,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行小批量分裝。所有檢測(cè)工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1. 為取得最佳測(cè)定效果,在用單管的化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定時(shí),樣品和測(cè)定試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制一致;使用具有化學(xué)發(fā)光測(cè)定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時(shí),宜先把樣品全部加好,然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑。
2. 由于溫度對(duì)酶反應(yīng)有影響,所以測(cè)定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測(cè)定
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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