人堿性磷酸酶（ALP）化學(xué)發(fā)光mianyi檢測(cè)試劑盒基本原理及操作步驟

更新時(shí)間：2019-06-21

點(diǎn)擊次數(shù)：1724

產(chǎn)品描述

英文名稱(chēng)	Human ALP (Alkaline Phosphatase) CLIA Kit
中文名稱(chēng)	人堿性磷酸酶(ALP)化學(xué)發(fā)光mianyi檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)	E-CL-H0138c	種屬	Human/人
規(guī)格	96T/Kit (812 strips) 48T/Kit (86 strips)
檢測(cè)方法	雙抗體夾心法
檢測(cè)范圍	3.125~200ng/mL	靈敏度	1.875ng/mL

基本原理

本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Human ALP抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ALP會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Human ALP抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Human ALP抗體與結(jié)合在包被抗體上的Human ALP結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成mianyi復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光mianyi分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值（CL），ALP濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中ALP的濃度。

操作步驟

1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各 100μL，37℃孵育90分鐘

2. 倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入 100μL 生物素化抗體工作液，37℃孵育 60 分鐘

3. 洗滌 3 次

4. 加入 100μL 酶結(jié)合物工作液， 37℃孵育 30 分鐘

5. 洗滌 5 次

6. 加入 100μL 底物溶液， 37℃孵育 5 分鐘左右

7. 讀數(shù)

8. 結(jié)果計(jì)算